由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本抗体为兔源多克隆抗体货号A302-374A特异性靶向UTX蛋白又称KDM6A赖氨酸特异性去甲基化酶6A的内部区域第725至775位氨基酸之间。UTX是一种含JmjC结构域和TPR重复序列的组蛋白去甲基化酶特异性催化组蛋白H3第27位赖氨酸H3K27的二甲基化和三甲基化去除从而激活基因转录在胚胎后部发育和HOX基因表达调控中发挥关键作用。该抗体经抗原亲和纯化未偶联标记适用于免疫沉淀IP和免疫印迹WB且与人、小鼠样本有交叉反应性。以下将从基本参数、免疫原信息、应用条件、储存稳定性及生物学背景等方面进行详细说明。一、关键规格参数项目 | 详细内容靶标 | UTX / KDM6A (Lysine Demethylase 6A)反应种属 | 小鼠、人类宿主 | 兔克隆性 | 多克隆抗体形式 | 完整IgG免疫原 | 对应人UTX蛋白第725至775位氨基酸之间的表位参考序列NP_066963.1GeneID 7403亚型 | IgG偶联物 | 未偶联纯化方式 | 抗原亲和纯化使用固定化的UTX特异性表位抗原物种 | 人浓度 | 1000 µg/mL缓冲液 | Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液pH 7~8含0.09%叠氮钠储存条件 | 2–8 °C保质期 | 收货后1年生产流程 | 亲和纯化后通过Beer定律测定IgG浓度1 mg/mL IgG在A280下吸光值为1.4 注0.09%叠氮钠作为防腐剂在IP后WB使用HRP标记二抗时需注意其抑制作用。建议在IP洗脱或二抗孵育前充分去除叠氮钠。二、免疫原与特异性本抗体的表位定位于人UTX蛋白的内部区域第725至775位氨基酸该区域位于TPR重复序列与JmjC结构域之间。通过固相载体上固定的特异性表位进行亲和纯化确保抗体识别天然及变性的UTX。经内部验证该抗体可检测人源和小鼠源UTX且不与其同源蛋白UTY由Y染色体编码在男性中表达发生显著交叉反应取决于序列保守性。实际实验中建议以阳性对照如HEK293或HeLa细胞裂解液确认信号。UTX分子量约为154 kDa在WB中呈现为清晰的高分子量条带。三、推荐应用与实验条件以下稀释度均为起始推荐范围用户需根据具体实验体系进行优化。1. 免疫印迹Western Blot, WB稀释度1:10,000 – 1:25,000超高稀释比显著节约抗体用量封闭液及抗体稀释液5%脱脂奶粉-TBSTTris缓冲盐水0.1% Tween-20孵育条件一抗4°C孵育过夜推荐二抗推荐常规细胞裂解液WB使用山羊抗兔IgG重链轻链抗体如货号A120-101P。免疫沉淀后WB为避免变性IP产物中重链~55 kDa信号干扰推荐使用抗兔IgG轻链特异性HRP标记二抗并在封闭液中添加5%正常猪血清货号S100-020以降低背景。阳性对照HEK293、HeLa或小鼠胚胎成纤维细胞裂解液。UTX分子量较大~154 kDa建议使用6-8% SDS-PAGE凝胶和PVDF膜0.45 μm孔径转膜采用湿转法100V2小时或30V过夜。2. 免疫沉淀IP用量6 µg抗体 / mg总蛋白裂解液操作建议裂解液推荐使用非变性裂解缓冲液如NP-40或RIPA缓冲液但避免SDS以维持UTX与复合物如COMPASS样复合物的相互作用。孵育条件4°C旋转孵育2小时或过夜。使用Protein A/G琼脂糖或磁珠捕获免疫复合物。洗脱后通过WB检测务必使用抗兔IgG轻链特异性二抗以避免重链干扰。阳性对照过表达UTX的细胞裂解液或内源性表达较高的细胞如HEK293、HeLa。 注本产品未验证用于IHC或ICC-IF用户需自行探索。四、产品特性与质量控制纯化工艺采用表位特异性亲和纯化较常规蛋白A/G纯化具有更高的特异性显著降低非特异性背景。免疫原选择在保守的TPR和JmjC之间的独特区域有助于区分UTX与其他JmjC家族成员如JMJD3/KDM6B。浓度与效价浓度高达1000 µg/mLWB推荐稀释比达1:10,000~1:25,000每微升抗体可制备10-25 mL工作液经济性极佳尤其适合高通量筛选或长期项目。功能验证每批抗体均通过WB检测多种细胞裂解液中的内源性UTX~154 kDa确认单一条带位置正确。同时通过IP验证其捕获内源性UTX及相互作用蛋白的能力。批次间一致性生产记录完整遵循内部QC标准符合ISO 9001质量管理体系母公司Fortis Life Sciences。优势总结WB超高稀释比1:25,000 → 单次实验成本极低IP用量明确6 µg/mg裂解液 → 减少优化时间轻链专用二抗配套方案 → IP-WB无重链干扰长效稳定储存2-8°C → 即用型方便五、储存与稳定性储存温度2–8°C严禁冷冻。反复冻融会导致抗体变性、效价下降。运输条件湿冰运输收货后请立即按上述温度保存。分装建议若需长期使用建议分装成小份后存放于2–8°C避免污染。不可稀释后长期储存。有效期自收货之日起1年。过期产品可能信号减弱建议重新订购。六、生物学背景UTX的功能与研究价值UTXKDM6A是一种依赖JmjC结构域的组蛋白去甲基化酶特异性去除组蛋白H3第27位赖氨酸的二甲基化H3K27me2和三甲基化H3K27me3但对单甲基化H3K27me1无活性。H3K27me3是多梳抑制复合物PRC2沉积的抑制性组蛋白标记UTX通过去除该标记激活基因转录。UTX的主要功能与研究领域包括发育调控UTX是后部发育的关键调节因子通过调控HOX基因簇的表达影响体节分化和肢体形成。表观遗传与转录激活UTX作为COMPASS样复合物的核心组分促进H3K4甲基化活性标记与H3K27去甲基化的协同作用激活靶基因。肿瘤抑制与癌症UTX在多种癌症如膀胱癌、肾癌、多发性骨髓瘤中发生功能缺失突变作为肿瘤抑制因子发挥作用。KABUKI综合征2型Kabuki syndrome type 2即由KDM6A突变引起。性别特异性生物学UTX由X染色体编码在女性中可能逃脱X失活其同源基因UTY位于Y染色体两者功能部分冗余但存在差异。免疫与炎症UTX调控Th1和Th17细胞分化影响自身免疫疾病进程。典型研究领域表观遗传学与染色质调控发育生物学HOX基因、体节形成癌症生物学肿瘤抑制、耐药性X染色体失活与性别差异免疫细胞分化与功能